PRODUCT CLASSIFICATION
產(chǎn)品分類豬藍(lán)耳病(PRRS)ELISA試劑盒*
上海信帆生物供應(yīng)的豬藍(lán)耳?。≒RRS)ELISA試劑盒質(zhì)量穩(wěn)定,可用于獸醫(yī)診斷!
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
豬藍(lán)耳?。≒RRS)是一種高致病率、高死亡率的病毒病,給國內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的損失。在免疫預(yù)防工作中,接種了疫苗后,由于多種因素可能導(dǎo)致豬不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平藍(lán)耳病病毒抗體。
本試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)豬血清中PRRSV抗體,用于免疫疫苗后抗體動(dòng)態(tài)水平監(jiān)測(cè),指導(dǎo)免疫預(yù)防工作,評(píng)估豬場(chǎng)藍(lán)耳病免疫狀況,也可用于藍(lán)耳病的流行病學(xué)調(diào)查。
【產(chǎn)品內(nèi)容】
試劑盒主要成分 | 數(shù) 量 |
抗原包被板(PRRSV) | 96T×2 |
陽性對(duì)照 | 1ml×1 |
陰性對(duì)照 | 1ml×1 |
酶標(biāo)記抗體 | 20ml×1 |
樣品稀釋液 | 50ml×1 |
底物液 | 20ml×1 |
終止液 | 15ml×1 |
20×濃縮洗滌液 | 50ml×1 |
封口膠 | 2份 |
使用說明書 | 1份 |
【成分性狀】
包被板 | 96孔塑制微孔板,無色透明,干燥,無雜質(zhì)吸附 |
酶標(biāo)結(jié)合物 | 略帶黃色澄明液體 |
陰、陽性對(duì)照 | 略帶黃色澄明液體 |
樣品稀釋液 | 略帶黃色澄明液體 |
濃縮洗滌液 | 無色或略帶黃色的澄明液體 |
底物液 | 無色或微藍(lán)色澄明液體 |
終止液 | 無色澄明液體,低溫條件下可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀 |
【用法與判定】 按以下步驟進(jìn)行:
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器;
1.2 微量移液器配套使用的槍頭;
1.3 用來稀釋洗滌液的500ml量筒;
1.4 適用于檢測(cè)96T微孔板的酶標(biāo)儀;
1.5 用于稀釋樣品的1.5ml Ep管;
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行50倍稀釋(建議:4μl血清樣品加入196μl樣品稀釋液中),樣品加入包被板前要充分混勻,稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意:①制備血清用的血液樣本應(yīng)無溶血現(xiàn)象發(fā)生;②不能稀釋陰性、陽性對(duì)照。
3、操作步驟 (﹡使用前應(yīng)輕輕旋轉(zhuǎn)或震蕩予以混勻,所有試劑應(yīng)恢復(fù)至室溫)
3.1 在A1和A2孔中分別加入100μl陰性對(duì)照;
3.2 在A3和A4孔中分別加入100μl陽性對(duì)照;
3.3 取100μl稀釋好的待檢樣品加入相應(yīng)孔中,并做好記錄;
3.4 37℃孵育30min;
3.5 將各孔的液體棄入廢液桶,每孔加250μl的洗滌液(試劑盒內(nèi)20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結(jié)晶,需先溶解后,方可進(jìn)行稀釋)進(jìn)行洗板,重復(fù)5次,每次30s;
﹡加液時(shí)防止各孔間洗滌液串流影響檢測(cè)結(jié)果,盡量將孔內(nèi)洗滌液拋甩干凈;
3.6 每孔加100μl酶標(biāo)結(jié)合物;
3.7 37℃孵育30min;重復(fù)步驟3.5;
3.8 每孔加100μl底物液;
3.9 37℃孵育10min(避光顯色);
3.10 每孔加50μl的終止液;
3.11 立刻于450nm波長處測(cè)定各孔的吸光度值,即OD450值。
4、試驗(yàn)有效性判斷
4.1陰性對(duì)照:正常情況下,陰性對(duì)照孔OD450值≤0.3;
4.2陽性對(duì)照:正常情況下,陽性對(duì)照孔OD450值≥0.6;
4.3臨界值(C.O.)計(jì)算:臨界值=0.18+陰性對(duì)照均值;陰性對(duì)照OD450值大于0.3時(shí)應(yīng)舍棄,如所有陰性對(duì)照OD450值均大于0.3時(shí)須重復(fù)實(shí)驗(yàn);陰性對(duì)照低于0.05時(shí)以0.05計(jì)算。
4.4結(jié)果判定: 檢測(cè)樣品OD450值≥臨界值,判定該檢測(cè)樣品為陽性; 檢測(cè)樣品OD450值<臨界值,判定該檢測(cè)樣品為陰性。
【注意事項(xiàng)】
(1)待檢血清樣品數(shù)量過多時(shí),應(yīng)先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后,再統(tǒng)一將血清樣品加入酶標(biāo)板中,使反應(yīng)時(shí)間一致。
(2)試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。
(3)底物液和終止液對(duì)皮膚有刺激性,注意防護(hù)。
(4)底物液不要暴露于強(qiáng)光和任何氧化劑;使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
(5)所有試劑應(yīng)在2~8℃存放;使用前恢復(fù)到室溫,使用后放回2~8℃。
(6)注意防止試劑盒組分受到污染。
(7)不要使用超過有效期的試劑,不同批次試劑盒的組分不要混用。
(8)操作過程中的移液、時(shí)間和洗滌必須確。
【規(guī)格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2~8℃避光保存,有效期為12個(gè)月
豬藍(lán)耳?。≒RRS)ELISA試劑盒*
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