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上海信帆生物:NanoLuc螢光素酶技術(shù)

更新時間:2016-05-31      瀏覽次數(shù):2903

NanoLuc™螢光素酶是Promega公司推出一種新型的螢光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171個氨基酸),發(fā)光更亮,比任何現(xiàn)有的生物發(fā)光酶用途更加廣泛的特點,它是目前性能的生物發(fā)光報告基因之一。NanoLuc™螢光素酶的這些屬性為報告基因檢測提供了新的功能,在需要更高靈敏度的復(fù)雜生物學(xué)應(yīng)用中深具潛力。

NanoLuc技術(shù)包含一種新型底物——furimazine和一種*的酶(NanoLuc™螢光素酶),前者由Promega公司有機化學(xué)家開發(fā),后者由Promega公司的研究科學(xué)家利用定向進化技術(shù)開發(fā)。它具有*的小巧體積,可以用于增強的病毒傳遞和蛋白融合,而且它很容易從細胞中分泌。NanoLuc™螢光素酶比螢火蟲(Photinus pyralis)或海腎(Renilla reniformis)螢光素酶的發(fā)光高兩個數(shù)量級,在難轉(zhuǎn)染的細胞中也能獲得更好表現(xiàn)。此外,NanoLuc可應(yīng)用在更多相關(guān)模型中,包括復(fù)雜的生物樣品。NanoLuc螢光素酶簡單易用——僅需加樣-檢測,且信號穩(wěn)定,可以不經(jīng)任何改良,實現(xiàn)從實驗臺操作到高通量篩選的規(guī)模放大應(yīng)用。

為滿足在“下一代”遺傳報告基因中的多種應(yīng)用需求,我們提供12個版本的 NanoLuc螢光素酶質(zhì)粒。產(chǎn)品包括NanoLuc-PEST(NlucP),它將蛋白表達水平變化與轉(zhuǎn)錄活性改變密切偶聯(lián),并增加信噪比。對于分泌型報告基因,我們通過融合N-末端分泌信號(secNluc)來制備NanoLuc螢光素酶載體。使用Nano-Glo™螢光素酶檢測試劑,發(fā)光量在跨越1,000,000倍的濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,且信號半衰期≥2小時。

手機拍攝的NanoLuc™螢光素酶發(fā)光信號。(注:96-孔板中, 轉(zhuǎn)染了NanoLuc™螢光素酶載體的HEK293細胞,50000細胞/孔)

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