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雌二醇(E2)放免實驗代測
雌二醇(estradiol),亦稱“動情素"、“求偶素"。雌激素的一種。含量多,活性也強。由卵巢內卵泡的顆粒細胞分泌。其代謝物是雌酮及雌三醇。含18個碳原子。其靶器官為子宮、yin道、輸卵管和垂體。是一種為經(jīng)皮膚吸收的雌激素治療劑。補充女性卵巢分泌的17-β雌二醇的不足,同時又可避免因口服引起的副作用(乳房疼痛、體重增加、高血壓、膽結石及肝功能異常等)。
[使用目的]
用于定量測定科研血清(或血漿)中雌二醇的濃度。
[用途]
雌二醇是一種 18 碳類甾體激素,分子量為 272D。在女性,月經(jīng)周期的卵泡期由卵泡內膜細胞與顆粒細胞分泌;黃體期由內膜黃體細胞分泌;妊shen期由胎盤合成。在男性,則由腎上腺皮質網(wǎng)狀帶分泌的雌烯二酮在外周轉化而來;也可由睪wan Sertoll 氏細胞轉化而成。
本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗原理:含雌二醇的樣品和125I 標記的雌二醇衍生物與相應的抗體反應形成抗原抗體復合物。反應后加入二抗及PEG,使免疫復合物沉淀,離心,測沉淀放射性計數(shù)。通過標準曲線得到樣本中雌二醇)的濃度。
[使用前準備]
試驗前,恢復樣本至室溫,小心搖勻血清樣本。
[實驗方法]
1、 將實驗所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進行編號,所有實驗均做雙管重復;
A B C D E F G (單 位)
0 5 25 100 300 750 2000 pg/ml
3、 取每個濃度的標準品、質控血清和樣本 200µl 加入相應編號的試管中;
4、 每管均各加入 200µl 標記物工作液;
5、 每管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻;
6、 37℃溫育 1.5 小時;
7、 每管均各加入 1000µl 分離劑后,充分混勻;
8、 室溫放置 5~10 分鐘后,離心 3500 轉/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、用 γ-計數(shù)器測定各管計數(shù)CPM. 推薦檢測時間: 1 分鐘
9、 從標準曲線上讀取樣本及質控血清的濃度。
雌二醇(E2)放免實驗代測
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