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產(chǎn)品分類TECHNICAL ARTICLES
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易洗脫鏈霉親和素瓊脂英文名稱:Easy Elution Streptavidin-Berpharose FF 貨號:B2380鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF(易洗脫型)是一種將鏈霉親和素(ee)鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的親和層析分離介質(zhì),利用生-物素與鏈霉親和素配體之間的相互作用分離純化生物-素或生物-素化的抗原、抗體、核酸等物質(zhì)。本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途。
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易洗脫鏈霉親和素瓊脂
英文名稱:Easy Elution Streptavidin-Berpharose FF
1.產(chǎn)品介紹
鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF(易洗脫型)是一種將鏈霉親和素(ee)鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的親和層析分離介質(zhì),利用生-物素與鏈霉親和素配體之間的相互作用分離純化生物-素或生物-素化的抗原、抗體、核酸等物質(zhì)。
本產(chǎn)品與普通的鏈霉親和素-瓊脂糖凝膠FF相比,優(yōu)勢在于可以在溫和條件下解離洗脫生物-素化物質(zhì),而不必再使用變性條件洗脫,從而能夠更好的保持純化樣本的活性,增加填料的使用壽命。
2.規(guī)格:1ml(預(yù)裝柱)、5ml(預(yù)裝柱)、10ml(預(yù)裝柱)、20ml、100ml、500ml
3.儲存溫度:4-8℃
4.純化流程
①緩沖液:
結(jié)合緩沖液:20mM NaH2PO4、 150mM NaCl、pH7.4
洗脫緩沖液: 1-5mM D-生物-素
②樣品準(zhǔn)備:
上柱的樣品應(yīng)盡量保持與結(jié)合緩沖液一致。通??捎猛肝?、超濾、稀釋等方法處理樣品。并且上柱前應(yīng)過0.45μm濾膜或高速離心去除不溶物。
③樣品純化:
(1)裝柱、平衡:取適量的填料裝入合適的層析柱中,用結(jié)合緩沖液平衡5個柱體積,建議流速為100cm/h。
(2)上樣:將準(zhǔn)備好的樣品緩慢上柱,為保證樣品與鏈霉親和素充分結(jié)合,應(yīng)控制好上樣流速,建議流速為15-50cm/h。
(3)淋洗:上樣后用結(jié)合緩沖液平衡10個柱體積以上,或平衡至基線,洗去雜質(zhì),推薦流速為100cm/h。
(4)競爭性洗脫:用洗脫緩沖液洗脫抗體,收集洗脫峰,建議流速為100cm/h。
(5)清洗:洗脫后的柱子應(yīng)用結(jié)合緩沖液平衡,并用20%乙醇保存柱子,于4-8度保存。
5.注意事項
1) 使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響純化效果。
2) 去除一些沉淀或變性物質(zhì),建議使用下面的方法用2倍柱體積的0.1M NaOH溶液進行清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH7.4清洗。去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì)3-4倍柱體積70%乙醇或2倍柱體積的1% TritonX-100清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH 7.4清洗。
3) 本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,4-8℃。
4) 2-25℃,常壓,避光運輸。
5) 僅供科研實驗使用。
易洗脫鏈霉親和素瓊脂
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